COVID-19 诊断

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October 24, 2021

冠状病毒传染病-19 诊断 (-诊断) 通过取样和分析来诊断是否检测到 SARS-CoV-2。两个主要的检测器检测响应病毒或感染而产生的抗体的存在。病毒是否存在于体内的诊断用于使卫生当局能够跟踪和控制疫情。抗体测试显示受测者是否患有 COVID-19,但在感染后数周内不会产生抗体,因此此时无法诊断该人是否被感染。诊断用于评估疾病的流行程度,并允许估计死于感染的人数。诊断样本的分析和感染的确定由医学实验室科学家使用自动分析仪在医学实验室进行。或者,可以当场或在医生办公室立即检测到感染。

样品采集、保存和运输

收成

收集上呼吸道(鼻子、嘴巴、呼吸道等)和下呼吸道(肺)的标本。医护人员在穿戴个人防护装备的情况下,将下呼吸道(痰)的样本放入单独的容器中,并在上呼吸道的鼻腔中插入一根长而有弹性的棉签,从背部收集流鼻涕等分泌物鼻壁。如果客户与实验室事先达成协议,则采集血清。根据中央检疫对策本部的《冠状病毒传染病-19确诊试验指南》,各标本的种类、剂量、容器如下。

保护和运输

所有标本采集后最好立即冷藏(2-8℃)保存,并尽快运送至实验室。但是,如果样品不能立即运输或培养,则将其储存或运输在防腐剂溶液(例如缓冲甘油盐水)、Cary & Blair 或运输培养基中。病毒在病毒转运介质(VTM)中储存和运输,根据《2019新型冠状病毒实验室诊断指南》,样本容器、运输条件和储存机构如下。

测试

病毒诊断检测方法包括细胞培养、抗原抗体检测和分子检测。

细胞培养测定

检验时间长,缺点是不适合大规模检验。它有利于隔离病毒并将其用于其他任务。传统的诊断测试被评估为不适当和危险的。

抗原/抗体检测方法

它是一种检测抗原(病毒)或检查新冠19病毒进入人体后形成的抗体的方法。身体产生针对特定传染病的抗体通常需要大约 2 至 4 周的时间,因此在感染初期很难确定是否确认了“COVID-19”。然而,它的优点是能够检查无症状(不知道)确诊病例或在“阴性”转换后是否形成抗体。在中国,众所周知,抗体检测方法是作为现有检测方法的辅助手段。

分子检测

在分子诊断中,使用基因序列(序列)合成和测试测试目标。

Pancorona PCR 检测和测序分析

首先,使用PCR测试的DNA扩增技术是一种复制极少量DNA并根据需要将其扩增的技术,目的是获得可用于分析的特定DNA序列的足够样本。由于特定部分的DNA在每个过程中都会加倍,例如,只需30个循环,就可以从一个DNA分子中获得超过10亿个DNA。通常,患者的唾液或痰液中所含的病毒不足以确诊,因此通过使用可区分冠状病毒的核苷酸序列对 DNA 进行扩增,可以很容易地确认样本中是否存在冠状病毒。所需的检测时间进行冠状病毒检测和测序分析总共需要1-2天左右,检测难度比新冠19检测高,后面会讲到先进行泛冠状病毒检测,顾名思义,它没有指定新的冠状病毒 19 病毒,现有六种类型(HCoV 229E、HCoV NL63、HCoV OC43、HCoV HKU1、SARS-CoV、MERS-CoV)以及包括新冠状病毒在内的所有冠状病毒。检测。因此,阴性测试意味着您没有感染冠状病毒。据了解,大约需要8个小时,如果泛冠状病毒检测结果为阳性,则进行第二次测序,并与现有的六种冠状病毒的核苷酸序列进行比较,如果没有匹配的病毒,则使用“确定新电晕的“擦除法”方法。冠状病毒之间的基因彼此大约有 95% 相同。据说这需要大约16个小时。

实时逆转录聚合酶链反应

实时逆转录 PCR(Real-time RT-PCR)“实时确认 PCR 反应扩增的 DNA,并量化 DNA 的量以及样品中目标 DNA 的存在,无需电泳。分析是可能的。” 换句话说,实时基因扩增检测技术是在PCR技术中,在两个“仅存在于新型冠状病毒的核苷酸序列”上附加一个“引物”或“探针”的方法。它作为新型 Corona 19 的诊断试剂,只有当该引物与特定基因结合时才会发生扩增反应。因此,注入诊断试剂后,当打开基因扩增设备时,如果样本(标本)扩增到足够达到一定值,则确定存在新冠(阳性),反之则为,是否定的。这项技术是公开的,只需要根据病毒的遗传信息确定要克隆的核苷酸序列,而且自从COVID-19爆发以来,中国、美国、德国、泰国、和香港已经开发和使用了这种技术。韩国在分享测试方法、开发、量产试剂和评估测试方法后,于1月31日推出了该测试方法。

实时逆转录聚合酶链反应的诊断标准

根据根据传染病分析中心和世界卫生组织的指南制定的2019新型冠状病毒实验室诊断指南,E基因PCR作为筛选试验,orf1b基因的RdRp区PCR被确认为确认测试。)用作 个别基因检测阳性/阴性标准的最终确定 确认确定能力 如果在私人医疗机构对疑似患者的样本进行的测试首次检测呈阳性,则必须将样本送到韩国疾病控制中心和预防再次检查测试是否为阳性。应该是。如果疑似患者的阳性结果经两次确诊并转为确诊病例,则视为医疗机构已证明其诊断能力,下一位疑似患者只能通过化验结果确认。(RdRp 基因、E 基因;N 基因)

诊断套件

Oh Sang Siel 的子公司 Oh Sang Healthcare 开发的诊断试剂盒是“GeneFinder COVID-19 Plus RealAmp”,于 2020 年 3 月中旬获得韩国食品和药物安全部的海外出口许可,目前正在出口到30多个国家。Osang Healthcare 的诊断试剂盒使用实时基因扩增 (RT-PCR) 诊断 COVID-19 感染。2020年4月16日,Osang Ziel获得法国国家药品管理局(ANSM)对Ohsangiel子公司Osang Healthcare的COVID-19诊断试剂盒的产品批准。Osang Healthcare 获得了该项目的批准,因为法国国家药品管理局 (ANSM) 将 Osang Healthcare 的 GeneFinder™ COVID-19 Plus RealAMP 试剂盒添加到批准的药物清单中。2020 年 4 月 18 日,Osang Healthcare 的 COVID-19 诊断试剂盒获得了美国食品和药物管理局 (FDA) 的紧急使用授权 (EUA)。3月初,欧生医疗是国内首家向FDA申请紧急使用许可的企业。

脚注